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实时(定量)PCR的作用以及实时PCR同质检测的方

发布时间:2016-05-17 点击:
仪器和方法的发展使我们已经可以检测PCR过程,实时收集数据。实时PCR是20世纪90年代初Cetus公司的Higuchi和合作者们发表的(Higuchi et al.,1992; Higuchi et al.,1993),有时它也被称为定量PCR或动力学分析。它能分析PCR循环间的源于目标序列扩增的荧光信号改变。这一分析不用打开反应管,被称为闭管或同质检测。
 
几种实时PCR同质检测的方法已经发表(Foy及Parkes,2001;Nicklas及Buel,2003)。最普通的方法使用TaqMan 5’荧光或使用插入染料(如SBYR@Green高特异性结合双链DNA分子。TaqMan方法检测荧光改变源于双染料标记的探针与特异目的序列脱离。SYBR Green检测任何PCR产物的形成。